硝基呋喃类 (Nitrofurans) 抗菌剂是一种广效性抗生素,因价格较低廉且疗效佳,广泛用于畜禽及水产养殖鱼类,用以治疗由大肠杆菌或沙门氏杆菌所引起之肠炎,养殖鱼之疖疮、赤鳍病、溃疡病等,于饲料中添加或养殖药浴使用。由于硝基呋喃类抗菌剂及其代谢物对人体长期食入有致癌、致畸胎及安全之顾虑,1995
年起欧盟 (European Union) 禁止硝基呋喃类抗菌剂在食用之畜禽及水产动物使用,并严格执行对输入之食用鱼、虾及禽类进行硝基呋喃的残留检测,2002 年美国亦起而效尤。
硝基呋喃类抗菌剂原型药在生物体内代谢迅速,无法侦测;而其代谢物因和蛋白质结合而相当安定,故利用代谢物的检测可反应硝基呋喃类抗菌剂的残留状况。硝基呋喃类 (Nitrofurans) 抗菌剂常见有以下四种药物-呋喃唑酮 (Furazolidone)、呋喃它酮(Furaltadone)、呋喃西林(Nitrofurazone) 和 呋喃妥因
( Nitrofurantoi ) 。代谢物分别为AOZ ( 3-amino-2-oxazolidinone ) 、AMOZ
(3-amino-5-morpholino-methyl-2-oxazolidinone)、SEM(semicarbazide)、AHD (1-aminohydantoin)。
目前普遍利用LC-UV、LC-MS、LC-MS/MS进行SEM的残留检测,相较于高成本的仪器分析,酵素免疫检验法可提供一经济、便利、低成本且大量初筛的检测。本公司研发之呋喃西林(Nitrofurazone) 代谢物-SEM酵素免疫检验试剂套组,经16小时的衍生及萃取步骤,ELISA分析部分不到1小时即可完成检测。鱼肉、虾肉、生乳、蜂蜜之灵敏度可达0.2 ppb,鸡肉之灵敏度可达0.4 ppb。
试剂内容:
1、 微量测试孔盘 (Microtiter well plate):微量测试孔盘:每条8 孔,一盘12 条
2、 SEM 标准溶液(SEM standard): 0 ppb, 0.05 ppb, 0.1 ppb, 0.3 ppb, 0.9 ppb, 8.1 ppb 各一瓶,1.5 mL / 瓶
3、10倍浓缩萃取/清洗液 (10× Conc. Extraction / Washing solution):一瓶,50 mL / 瓶
4、10倍浓缩缓冲液 (10× Conc. Buffer) :一瓶,50 mL / 瓶
5、5倍浓缩脢标记物稀释液 (5× Conc. Enzyme Conjugate Diluent ) :一瓶,2 mL / 瓶
6、衍生试剂 (Derivative reagent) :一瓶,12 mL / 瓶
7、浓缩脢标记物(SEM Conjugate (Conc.)):一瓶,150 μL / 瓶 (需保存于2 ~ 8 ℃)
8、底物溶液 (Substrate solution,TMB) :一瓶,12 mL / 瓶
9、反应终止液 (Stop solution) :一瓶,13 mL / 瓶
特异性 (Specificity)
针对以下硝基呋喃类抗菌剂进行特异性交叉反应测试,结果如下:
Compound Cross-Reactivity(%)
3-amino-2-oxazolidinone (AOZ) < 0.01 %
3-amino-5-morpholino-methyl-2-oxazolidinone (AMOZ) < 0.01 %
1-aminohydantoin(AHD) < 0.01 %
检品敏感度(Sensitivity)
各类检体之检测敏感度如下:
检品 敏感度(ppb)
鱼、虾、生乳、蜂蜜 0.2
鸡肉 0.4
回收率(Recovery rate)
检品 回收率(%)
鱼、虾、生乳、鸡肉 80 ~ 120
蜂蜜 70 ~ 130 |